6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH;EC 1.1.1.49)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是磷酸戊 糖途径的关键酶,同时维持 NADPH 在细胞内的水平, NADPH 反过来维持细胞中谷胱甘肽的水平进而 保护细胞免受氧化损伤。因此 G6PDH 活性的高低可以从一定程度上反映生物体的生物合成和抗氧化能力。
G6PDH 催化 6-磷酸葡萄糖氧化为 6 -磷酸葡萄糖酸内酯,同时将 NADP+还原为 NADPH,传统方法是 检测 NADPH 在 340nm 处的吸光值。由于 NADPH 的摩尔消光系数(ε)较低,所以这种方法灵敏度低, 且严重受到干扰。
本试剂盒提供一种简单,灵敏,快速的测定方法:该酶促过程产生的 NADPH 与特异的显色剂反应, 产生在 450nm 处有最大吸收峰的有色物质,通过检测该有色物质在 450nm 的增加速率,进而计算出 G6PDH 酶活性的大小。
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、研钵。