0512-66188056

产品中心

技术服务 试剂盒开发

过氧化氢酶(CAT)试剂盒-可见显色法

货号:G0106F
规格:96样
价格:340
说明书:点击下载

  • 产品简介
  • 所需仪器
  • 操作指示
  • 相关文章
   过氧化氢酶(CATEC 1.11.1.6)普遍存在于植物动物组织中,其活性与生物体的代谢强 度及抗寒、抗病能力有一定关系。本试剂盒提供一种简单,灵敏,快速的测定方法,即 CAT 催化过氧化氢产生水与氧气,剩余的过氧化氢与一种新型显色探针显色,其在 510nm 处有最大吸收峰。通过过氧化氢的减少量来计算样本中 CAT 酶的活力。
   本试剂盒突出特点是从紫外波长(240nm:过氧化氢的检测波长)转换到可见波长 510nm)检测,无需使用石英比色皿或 UV 板。而且由于过氧化氢极其不稳定,直接检 测造成读值不稳定,且蛋白质等组分在此紫外波长下也有光吸收,影响结果精确性。

   分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、台式离心机、可调式移液器、研钵

1、 测定管吸光值≥空白管吸光值是什么原因,该如何调整?

 本试剂盒空白管应为最大值,出现测定管≥空白管吸光值则说明样本自身CAT酶活较低。可见在加完试剂二的5min反应阶段,测定管几乎无气泡产生。

出现这种情况有3种解决方案:
(1)取样时加大样本取样量,提取液体积不变;
(2)增加样本上清液的量,并同步缩减试剂一用量;
(3)加完试剂二反应5min后没有明显气泡,可延长该步骤的反应时间


2. 测定管几乎不显色是什么原因,检测的吸光值准确吗?

 测定管几乎不显色,说明样本CAT酶活较高。注意观察在加完试剂二的5min反应阶段,测定管会产生大量(密集)气泡。若检测吸光值<0.1(<0.1后吸光值越低,准确度越差),检测结果是不精确的。遇到这样的情况,为了得到准确的结果,建议客户将样本的上清液用提取液或蒸馏水稀释后,再按说明书操作表进行检测。


3. 按照说明书提供的方案重新测定标曲,为什么显色却没有值?为什么结果与说明书标曲有差异?

  在检测过程中,基本都存在人为误差、仪器设备误差。如果有明显颜色,吸光值却很低,建议检查以下3点:(1)检查仪器设备条件是否有误;(2)是否使用1mL光径为1cm的比色皿,检测液体的液面有没有在比色皿的三分之二以上;(3)CAT试剂二有没有按要求取用。

  当检测条件与吸光值均无误时,由于检测所用的酶标仪/分光光度计厂商不同,测定得到的吸光值差异一般不超过0.1;但比色皿光径不同时,检测结果会有差异(此类情况建议客户重新测定标曲)。
实验中务必遵循调零比色皿与测定比色皿是同一规格的原则!


4. 反应时间5min,大批量操作时如何避免误差?

若一次性检测样本较多,在显色反应阶段可酌情分批操作和读值,为保证数据的精确性,显色反应阶段最好半个小时内完成。有条件的客户尽量使用排枪进行实验操作。


5.试剂盒过保质期时,如何判断试剂盒能不能使用?

 不管是保质期内,还是过保质期的试剂盒,建议客户先按照说明书操作表的步骤检测一下空白管,若空白管无色则代表试剂盒无效或失效。


1.《Evaluating physiological changes of grass and semishrub species with seasonality for understanding the process of shrub encroachment in semiarid grasslands》.《 Functional Plant Biology》

2. 《The measurement and mechanism of lipid peroxidation in biological systems》.《Trends in Biochemical Sciences》

3. 《 Isolation and identification of algicidal compound from Streptomyces and algicidal echanism to Microcystis aeruginosa》. 《Methods of EnzymaticAnalysis》