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过氧化氢酶(CAT)试剂盒-可见显色法

货号:G0105F
规格:48样
价格:180
说明书:点击下载

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     过氧化氢酶(CAT,EC 1.11.1.6)普遍存在于植物动物组织中,其活性与生物体的代谢强度及抗寒、抗病能力有一定关系。本试剂盒提供一种简单,灵敏,快速的测定方法,即CAT 催化过氧化氢产生水与氧气,剩余的过氧化氢与一种新型显色探针显色,其在510nm 处有最大吸收峰。通过过氧化氢的减少量来计算样本中 CAT 酶的活力。

     本试剂盒突出特点是从紫外波长(240nm:过氧化氢的检测波长)转换到可见波长(510nm)检测,无需使用石英比色皿或 UV 板。而且由于过氧化氢极其不稳定,直接检测造成读值不稳定,且蛋白质等组分在此紫外波长下也有光吸收,影响结果精确性。


   分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、台式离心机、可调式移液器、研钵。

1、 测定管吸光值≥空白管吸光值是什么原因,该如何调整?

 本试剂盒空白管应为最大值,出现测定管≥空白管吸光值则说明样本自身CAT酶活较低。可见在加完试剂二的5min反应阶段,测定管几乎无气泡产生。

出现这种情况有3种解决方案:
(1)取样时加大样本取样量,提取液体积不变;
(2)增加样本上清液的量,并同步缩减试剂一用量;
(3)加完试剂二反应5min后没有明显气泡,可延长该步骤的反应时间


2. 测定管几乎不显色是什么原因,检测的吸光值准确吗?

 测定管几乎不显色,说明样本CAT酶活较高。注意观察在加完试剂二的5min反应阶段,测定管会产生大量(密集)气泡。若检测吸光值<0.1(<0.1后吸光值越低,准确度越差),检测结果是不精确的。遇到这样的情况,为了得到准确的结果,建议客户将样本的上清液用提取液或蒸馏水稀释后,再按说明书操作表进行检测。


3. 按照说明书提供的方案重新测定标曲,为什么显色却没有值?为什么结果与说明书标曲有差异?

  在检测过程中,基本都存在人为误差、仪器设备误差。如果有明显颜色,吸光值却很低,建议检查以下3点:(1)检查仪器设备条件是否有误;(2)是否使用1mL光径为1cm的比色皿,检测液体的液面有没有在比色皿的三分之二以上;(3)CAT试剂二有没有按要求取用。

  当检测条件与吸光值均无误时,由于检测所用的酶标仪/分光光度计厂商不同,测定得到的吸光值差异一般不超过0.1;但比色皿光径不同时,检测结果会有差异(此类情况建议客户重新测定标曲)。
实验中务必遵循调零比色皿与测定比色皿是同一规格的原则!


4. 反应时间5min,大批量操作时如何避免误差?

若一次性检测样本较多,在显色反应阶段可酌情分批操作和读值,为保证数据的精确性,显色反应阶段最好半个小时内完成。有条件的客户尽量使用排枪进行实验操作。


5.试剂盒过保质期时,如何判断试剂盒能不能使用?

 不管是保质期内,还是过保质期的试剂盒,建议客户先按照说明书操作表的步骤检测一下空白管,若空白管无色则代表试剂盒无效或失效。


1.《Evaluating physiological changes of grass and semishrub species with seasonality for understanding the process of shrub encroachment in semiarid grasslands》.2021.《Functional Plant Biology》.IF=3.1

2.《Effects of root characteristics on panicle formation in japonica rice under low temperature water stress at the reproductive stage》.2021.《Field Crops Research》.IF=5.224

3.《Mechanism of Cr (VI) Reduction by Pichia Guilliermondii ZJH-1》.2021.《Iranian Journal of Biotechnology》.IF=1.671